毛細管電泳儀分離條件的九步選擇流程

　　毛細管電泳原理及分析策略一、毛細管電泳的基本原理電泳是指電解質中帶電粒子在電場力作用下，以不同的速度向電荷相反方向遷移的現象。毛細管電泳（HPCE），是指離子或帶電粒子以毛細管為分離室，以高壓直流電場為驅動力，依據樣品中各組分之間遷移速度和分配行為上的差異而實現分離的液相分離分析技術。由于毛細管內徑小，表面積和體積的比值大，易于散熱，因此毛細管電泳可以減少焦耳熱的產生，這是與傳統電泳技術的根本區別。

　　毛細管電泳儀突出的優點：

　?。?05TP/m-107TP/m）、快速（幾十秒至幾十分鐘）；

　　分離模式多，選擇自由度大；

　　分析對象廣，小到無機離子大至整個細胞，具有“”分析功能或潛力。

　　操作可高度自動化；

　　樣品與試劑消耗量小，運轉費用低，無環境污染問題。

　　毛細管電泳儀分離條件選擇的流程

　　分離條件的選擇是毛細管電泳中z重要但也是z難之處。不同的專業研究工作者可能會有各自不同的選擇策略和流程，我們提出如下九步選擇流程，僅供參考：

　　第1步，盡可能多地了解分離樣品的類型、來源、組成及其性質；

　　第二步，根據樣品的可能性質和來源，選擇分離模式，若無樣品信息可先選CZE；

　　第三步，根據樣品性質確定檢測方法，一般先選直接紫外吸收；

　　第四步，確定樣品處理方式，包括衍生方案以及離心過濾除蛋白等；

　　第五步，根據樣品解離常數計算z佳pH，或利用75µmID毛細管和磷酸緩沖體系確定pH范圍;

　　第六步，根據所需pH構建緩沖體系，包括進一步優化pH、緩沖試劑濃度等；

　　第七步，優化其他操作參數，如毛細管尺寸、分離電壓和溫度等；

　　第八步，確定是否需要使用添加劑和使用非水溶劑；

　　第九步，確定是否需要換用其他分離模式。

　　在毛細管電泳條件選擇中，還應充分注意下列操作事項：

　?、賹悠泛途彌_液進行過濾或離心處理。

　?、诿毠艿南礈旎蚱胶?，與緩沖體系、pH以及柱子有關。磷酸根與石英和玻璃之間存在慢相互作用，需要延長平衡或沖洗時間，處理的時間應由分離重現性決定。

　?、塾档途彌_液的電導，應盡量使用所謂的“生物緩沖試劑”；欲降低檢測背景，則應盡量使用無機緩沖試劑。

　?、苡３址蛛x重現，要盡量采用相同的條件，包括毛細管、緩沖液、溫度、電壓、洗滌等。

　　以上便是今天關于毛細管電泳儀分離條件的九步選擇流程的全部分享了，希望對大家今后使用本設備能有幫助。